EFEITO DA INIBIÇÃO DA HIPUSINAÇÃO EM LEISHMANIA AMAZONENSIS.

Andressa Rodrigues de Souza

Fabiana Rodrigues dos Santos

Denise Brufato Ferraz

Dr. Claudio M. Costa Neto

Dr. Francisco Juarez Ramalho Pinto

O Fator de Início de Tradução-5A (eIF5A) é uma proteína de 18 kDa que participa da proliferação celular de eucariotos. A atividade do eIF5A na proliferação celular depende da reação de hipusinação, uma modificação pós-tradução em que lisina do Fator é modificada em hipusina pela ação da enzima deoxihipusina sintase. Dos compostos descritos com atividade inibitória na formação de eIF5A hipusinada destaca-se o composto N1-guanil-1,7-diaminoheptano (GC7), um inibidor específico da enzima deoxihipusina sintase. As leishmânias são protozoários da família Trypanosomatidae, gênero Leishmania, sendo a L. amazonensis a causadora da leishmaniose cutânea. Nosso laboratório tem procurado uma forma de bloquear a replicação desses parasitas com o uso de drogas para uma possível aplicação terapêutica. Neste trabalho investigamos o efeito do GC7 na proliferação in vitro de promastigotas de Leishmania amazonensis e na diferenciação das formas amastigotas em promastigotas. Curvas de crescimento das promastigotas foram construídas, na ausência ou presença de GC7, em meio Schneider/10% de soro fetal bovino (SSFB). As culturas com 100. 000 parasitas em 2ml de meio SSFB contendo GC7 em concentrações de 12,5 micromolar a 5 milimolar eram mantidas a 25ºC por 4 a 7 dias e a contagem feita diariamente com eritrosina B. Nestes experimentos foi possível observar uma redução na replicação do parasitas conforme se aumentava a concentração de GC7. Para o ensaio da diferenciação de amastigotas em promastigotas, camundongos BALB/c infectados foram sacrificados e suas patas retiradas para coleta das amastigotas. Foram formadas culturas com 100. 000 parasitas em meio contendo GC7 em concentrações de 1 milimolar a 5 milimolar. As formas amastigotas, intermediárias e promastigotas eram avaliadas diariamente. As culturas que continham GC7 mantiveram um padrão de diferenciação semelhante ao grupo controle durante todo o experimento. Esses resultados indicam que o GC7, quando utilizado em altas concentrações, atua inibindo a replicação dos parasitas. Por outro lado, o GC7 não inibe a diferenciação de amastigotas em promastigotas. Novos experimentos estão sendo realizados para confirmação deste achado.

Correspondência para: Andressa Rodrigues de Souza, e-mail: andressa_enf@yahoo.com.br